淀粉磷酸化酶(SP)測試盒

淀粉磷酸化酶(SP)測試盒

商品詳情：
測定意義：

淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase，SP)是淀粉代謝過程的可逆反應(yīng)酶，既可催化淀粉的合成，也可催化淀粉的分解。

在高等植物中，淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質(zhì)體中，負(fù)責(zé)延長淀粉的 α-1,4-葡萄糖鏈的非還原末端；淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵磷酸解產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸，負(fù)責(zé)葡萄糖鏈的磷酸解，是淀粉代謝過程中的關(guān)鍵酶。

在植物體中，淀粉磷酸化酶分解方向的底物無機(jī)磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個數(shù)量?茀?

測定原理：

淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵與無機(jī)磷反應(yīng)產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸，葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產(chǎn)生葡萄糖-6-磷酸，并在6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原NADP+產(chǎn)生NADPH，使340nm下吸光值增加。

需自備的儀器和用品：

酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提?。?/span>

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

3.血清等液體：直接檢測。

計算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計算:

（1）按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：

單位的定義：每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬。

前折疊蛋白亞基5ELISA試劑盒 PFDN5免費代測試劑

前折疊蛋白亞基4ELISA試劑盒 PFDN4免費代測試劑

前折疊蛋白亞基3ELISA試劑盒 PFDN3免費代測試劑

前折疊蛋白亞基2ELISA試劑盒 PFDN2免費代測試劑

前折疊蛋白亞基1ELISA試劑盒 PFDN1免費代測試劑

前胰淀粉樣蛋白ELISA試劑盒 ProIAPP免費代測試劑

前胸腺αELISA試劑盒 PTMα免費代測試劑

前庭蛋白1ELISA試劑盒 VEST1免費代測試劑

前梯度蛋白2ELISA試劑盒 AGR2免費代測試劑

前妊娠蛋白關(guān)聯(lián)子宮內(nèi)膜蛋白ELISA試劑盒 PAEP免費代測試劑

前列腺酶ELISA試劑盒 TGM4免費代測試劑

前列腺抑制肽ELISA試劑盒 PIP免費代測試劑

前列腺素還原酶2ELISA試劑盒 PTGR2免費代測試劑

前列腺素還原酶1ELISA試劑盒 PTGR1免費代測試劑

前列腺素I合酶ELISA試劑盒 PTGIS免費代測試劑
淀粉磷酸化酶(SP)測試盒α-L阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Af)測試盒/微量法100管/48樣

α-半乳糖苷酶(α-GAL)測試盒/分光光度法50管/24樣

α-半乳糖苷酶(α-GAL)測試盒/微量法100管/48樣

α-(α-AL)測試盒/分光光度法50管/24樣

α-(α-AL)測試盒/微量法100管/48樣

α葡萄糖苷酶(α-GC)測試盒/分光光度法50管/24樣

α葡萄糖苷酶(α-GC)測試盒/微量法100管/48樣

α酮戊二脫氫酶(α-KGDH)測試盒/分光光度法50管/48樣

α酮戊二脫氫酶(α-KGDH)測試盒/微量法100管/96樣
注意事項：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個樣做預(yù)實驗，如果測定的吸光值過高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰，因此，570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。